Los HPV Y la Testing los Papillomavirus humanoBoletín WHEC Práctica Clínica y Gestión de Directrices para proveedores de servicios de salud. Educación subvención concedida por la Salud de la Mujer y el Centro de Educación (WHEC). Los éxitos antiguos en cáncer cervical protegiendo estuvieron basé en el desarrollo de los criterios de por los morphologic a reconocer de cáncer cervical y sus precursores las celdas cobertizo. Comoquiera nuestra habilidad a dirigen cervical las enfermedades mucho vigentemente ha sido limitado cerca incompleto entendiendo de los pathogenesis y biología de cervical los neoplasia. El reconocimiento que humano los HPV los papillomavirus suscita más cervical los neoplasia sugiere que mejoré la granza y dirección las estrategias ese reflejan la biología y comportamiento de los HPV las infecciones quizás estén posible. El propósito de este documento es la testing y las áreas de investigación ongoing a para repasar y el resumir las solicitudes clínicas de los HPV la estructura y la biología de los HPVs será discutido. Biología de Infección de los HPV Human papillomaviruses are epitheliotropic, circular, double-stranded DNA viruses containing about 8000 base pair. Sobre 70 tipos de los HPV han sido caracterizado de que de otro modo que 20 infectan los hembra genital trecho. Los tipos de los HPV genital son clasificados el riesgo tan bajo o alto basó en si ellos son asociados usualmente con los carcinoma invasive y cervical. El riesgo bajo teclea los HPV-6,11 42 43 44 como y los others fuertemente son asociados con los condyloma los acuminate y estamos insólito en los LSIL las lesiones de los intraepithelial los squamous curso bajo. Estos viruses son encontrados infrecuentemente en alto curso los squamous los intraepithelial las lesiones los HSIL y no encontrar casi nunca en los carcinoma sólo. El riesgo HPV alto teclea incluso los HPV-16,18 31 33 35 39 45 51 52 56 58 68 y los others son encontrados usualmente en los LSIL amb y los HSIL y explican las mayoría de los HPV teclea a encontrado en los carcinoma invasive. A calificar un HPV tan distintivo teclea un virus debe ser y menos debe demostrar 90 secuencia del ADN la identidad con los loci específico dentro de los genome 1 los HPV que sabido los HPV los tipos a las tres la cloned. Los papillomaviruses humano los like otros viruses no poder independientemente their own reproducen. El término de la vida de los HPV así de ese modo cycle a requiere la maquinaria metabólica de a le infectado las celdas a patrón. Infección de los HPV es iniciada en los epithelial basal cubrir de un capa que contiene los mitotically activo las celdas ese reemplazan maduro senescent las celdas mudan. La capa basal es alcanzada por presumiblemente microscópico los mucosal los defectos. Las celdas Infected y basales contienen 20 a 100 copias de los HPV los episomal el ADN. Expresión de los genes tardíos y virosos sucede en las celdas maduras de los squamous resultando en la producción de los capsid tapando las proteínas y las totalidades virus las partículas. Al nivel claro y microscópico éste proceso corresponds to los LSIL los CIN yo y los koilocytotic los atypia. En más much carcinomas los HPV el ADN la replication no está completamente los episomal. Integración de los HPV el ADN en humano patrón el ADN quizás representen crucial trecho en cervical los carcinogenesis particularmente el desarrollo de los invasiveness. Detección de los HPV Los HPV que examinan recientemente los métodos ha sido repasado. Las mayoría de los HPV examina a detectar los HPV el ADN. Identificación de los traslados de los mRNA los HPV es de gran investigación el rédito pero detección de los RNA la requires special los procedimientos porque los RNase está ubicuo en el ambiente. Los HPV la testing de del ADN puede ser efectuado encima recientemente helado o fijo las celdas o tissue. La sensibilidad generalmente es reducida dentro a arreglado los ejemplares por la pérdida de la integridad del ADN. Las celdas para los HPV examinando pueden ser conseguidas vía los lavage o cerca cepillando swabbing o rozando la cerviz. Estrategias Each of éstos tiene a sus proponents pero los resultados usando estos métodos de colección son similares. Una consideración mayor in examinando los gynecologic los ejemplares está ese sobre 20 diferente los HPV tipos infectan la cerviz. Así pues examina que los HPV emplee también poc tipo que las sondas específicas no detectarán un porcentaje significativo de las infecciones. Anulación de ejemplar a la contaminación de en la clínica y el laboratorio ejemplar es esencial de evitar positive falso los resultados. Éste es un problema crítico cuando las técnicas de amplificación los PCR como son empleados 3. La Hibridación meridional que Eso es la referencia método para los HPV tecleando. Cuando apliqué a técnica recientemente material éste está sumamente sensibilizado in arregló material que la sensibilidad es reducida. En la hibridación Meridional el ADN extrajo de las muestras celulares es hendido con restricción las enzimas reconociendo específico el ADN las secuencias. Es un procedimiento complicado laboral y intensivo que la requiring los varios días a para efectuar y a exigir el uso de material radiactivo para la sensibilidad optimal. Quizás tamaño de y fijación muestra pequeña reduzcan la fiabilidad y la sensibilidad. Since the DNA is extracted from the material, it is unclear which of the cells in the sample the source of the HPV DNA detected is; no tissue localization is possible with this method. La hibridación meridional comoquiera provee la sensibilidad adecuada para detección de los HPV en los SILs y los carcinomas y los permisos además los HPV específico la mecanografía. Las sondas específicas proveen que los datos superiores de tecleando compararon con a blot la hibridación 4 que el ADN que fajó los patrones resultando de los electrophoresis y las señas con tipo que son conseguidas cons con punto. La Hibridación de Borrón de punto que Eso well es convenida a analizar números de ejemplares tiernos con viento. Los puntos del ADN denatured sobre los pasadores o los miembros que es cargado son examinados con los HPV teclean specific el ADN o los RNA las sondas. El material no es digerido con los endonucleases o los electrophoresed restricción. La información consiguió de a fajar los patrones está unavailable y alto fondo relacionó a los non la adherencia específica de las sondas al pasador quizás limiten interpretación. Los Radiolabeling o los métodos enzimáticos de detección pueden ser usados. La sencillez del procedimiento facilita la testing muchas muestras inmediatamente y los resultados de dentro de dos días 5 los réditos. La Hibridación que Eso In Situ combina detección de los HPV los ácidos nucleic con morfología así de ese modo permitiendo la localización de los HPV infección a específico las celdas o los tissues. Confiable la hibridación in situ kits a sois comercialmente libres para uso clínico. Detección de seña es realizada usando por un sistema de los biotin los avidin también semejante a en los procedimientos de o los b los radiolabled los immunoperoxidase eso empleado sondea. Uso de los biotin sondea a provee a resulta en a evita los logistical los problemas relacionado al manejo de 6 radiactivo y material que uno año y uno día en lugar de cuatro deja arriba el bodegaje de las sondas por. La sensibilidad de la hibridación in situ es cell que de las técnicas blotting con detección en la gama de los HPV los 1-20eso por menos. Este nivel de la sensibilidad está provechoso en los estudios de los SIL pero alguno los carcinomas quizás contengan también poco viroso las copias por detección y las mayoría de los HPV las infecciones en los cytologically los temas normales cannot son identificado. Los resbalamientos a lo largo múltiples son required de examinar con las sondas múltiples y los controles. Toma híbrida por líquido nuevamente ingeniado que Eso es los HPV basó a examinar que permita rabión detección y los quantitation de los HPV el ADN en número grande de muestras. En la citología esta técnica ha sido usada a para examinar a exfoliated las celdas a suspendido en los ViraPap primariamente la buffer Digene la Diagnostics y other líquido los buffers. La muestra del ADN denatured subsecuentemente es mezclado con los cócteles de 14 tipo específico los HPV los RNA las sondas en un microtiter bandeja. La wells en which la reacción sucede son cubiertos con un anticuerpo ese sujeta el ADN los RNA los hybrids. Quizás la reciente introducción de un genomic sondee a quizás para medir el ADN total y celular en el ejemplar a quizás permitan la calculación de la ratio de la cantidad de tipo la specific HPV el ADN a totalizar el ADN celular en la muestra a proveer una medida cruda de peso viroso así de ese modo. Resulta si la testing de Toma Híbrida revela bien inter y los intra el laboratorio reproducibility y a le correlacionaba a testamento con los HPV convencional a examina borrón como y Meridional. La prueba es y sondea a le reconocer a todo el mayor pathogenic rápida los HPV teclea que infecten el trecho hembra y genital. La prueba está algo menos sensibilizada que los PCR y está propenso a raro esporádico falso positive los resultados 7. Los FDA aprobó prueba para el riesgo HPV a es la Toma II Híbrida prueba. Los Polymerase Encadena la Reacción (PCR): que Eso no es un HPV técnica de sino que un método para el ADN particularmente amplificando para la presencia de que entonces puede ser examinado detección del ADN los HPV el ADN usando que borrón Meridional borrón o otra técnica punto estuviera. Como resultado de la amplificación PCR del ADN quizás detecten como poco como una copia de por uno millón de celdas los HPV. En los PCR un cebador del ADN sienta a is used to a iniciar múltiplo las rotondas de secuencia la replication específico del ADN. PCR-based HPV tests are especially important in epidemiologic studies and clinical studies of older women in which detection of low-level infection in normal subjects is important. The added sensitivity of PCR-based methods is less advantageous in studies of prevalent cervical neoplasia because most HPV-related lesions contain enough viral copies to be detected without amplification (8). Los HPV Examinando las Estrategias a para Mejorar los Pathologic Diagnosis y Dirección Clínica En 1996 el Instituto de Cáncer Nacional trabó un juicio prospectivo de los randomized le comparando estrategias para las mujeres con la citología cervical tres a dirección los informes revelando las celdas atípicas de de los ASCUS y los LSIL 9 significado undetermined los squamous. Los pacientes fueron en una citología conservadora de repeat los randomized que 6 cada meses se solamente agrupan un colposcopy los colposcopy inmediato de todos los pacientes un testing de para los tipos de los HPV los HPV la triage group y secundaria sabido a le para poner a una mujer al riesgo alto para cáncer group. El brazo de los LSIL fue tapado cuando eso temprano fue determinado que más gran que de las mujeres con los LSIL 80 los resultados fuisteis los HVP positivo. La recomendación de los ASCUS/LSIL o los la Triage Estudia los ALTAS juicio está ese los HPV la testing no está provechoso por las mujeres con los LSIL los resultados de prueba. El brazo de del juicio de los ALTS los ASCUS ha sido completado y los resultados fueron incluidos en el informe de la Sociedad Americana de los Colposcopy y la Patología ASCCP Cervical Conferencia 10 de Consenso. La recomendación de la conferencia de consenso fue a los intervalos hasta las dos que any of la citología de repeat de estrategias de tres dirección repitió mes de 4-6A consecutivo negativo para lesión de o la malignidad los resultados los intraepithelial son conseguidos los b los colposcopy inmediato o los c los HPV la triage es una aproximación aceptable para la dirección de los pacientes con la citología de los ASCUS. La triage secundaria que usa los HPV la testing es recomendado la estrategia tan preferido cuando líquido basé los preparativos fuimos usados por cervical la citología o cuando el CO colección por los HPV la testing del ADN fue haz. Si la prueba de los HPV resulta a es negativo. El repetir la citología por 12 meses no es necesario. Si eso es positivo la paciente debería tener los colposcopy. Si el informe de la citología original fuese la ASC los H atípico los squamous las celdas cannot regla fuera los HSIL los paciente debería someter los colposcopy sin los HPV la testing. Los algoritmos describiendo estas ASCCP le recomendó a dirección las estrategias estamos 11 libre. Las mujeres embarazadas con los ASCUS o los ASC los H la citología resulta no los le require a dirección diferente. Las mujeres de con los ASUS los Postmenopausal la contraindicación pueden tener la repeat cytologic evaluación tras tratamiento con un estrogen tópico si tiene. Si el resultado es nuevamente la ASCUS los colposcopy es sugerido. Las mujeres de con ninguna anormalidad de la citología los Immunocompromised deberían someter los colposcopy 12. Resumen Quizás el reconocimiento del papel central de los HPV en los neoplasia cervical tenga las implicaciones inmediatas para la diagnosis y el tratamiento de enfermedad cervical. Si la testing de los HPV prueba a para ser clínicamente provechoso tradicional la Papilla frotis pueden ser mejorado antes de new aproximación ese combinaría los cytologic la granza con ancillary la testing de las muestras. Es probable ese métodos de colección cervical de y interpretación la citología seguirán a para cambiar a. Será necesario para los clinicians a para sobrar informé la new de las tecnologías y a para obtener la appropriateness de su uso en sus prácticas individuales. Corrientemente los HPV el ADN la testing está siendo examinado tan una granza herramienta por la detección de las mujeres con los CIN in desarrollando los países dónde las instalaciones capaz a interpretan la citología cervical estamos careciendo. Todas las mujeres con los resultados altos risk y positivos serían remitidas para los colposcopy. Esta aproximación está improbablemente a siempre estar provechoso en los países dónde cervical la citología la granza ya bien es establecido por el precio de soltero los HPV prueba y la high el predominio de los HPV especialmente en las mujeres más tierno que 30 años. Las Referencias |